縱觀歷史,幾乎沒有哪一門科學技術(shù)像流式細胞術(shù)這樣凝結(jié)了眾多不同學術(shù)背景、不同科研領(lǐng)域科學家的心血。從流式細胞術(shù)的發(fā)明、改進和革新,到今天在各個領(lǐng)域應(yīng)用的拓展,每一步都是諸如生物學、生物技術(shù)、計算機科學、流體...[繼續(xù)閱讀]

    FCM的結(jié)構(gòu)一般分為5部分:①流動室及液流驅(qū)動系統(tǒng);②激光光源及光束成形系統(tǒng);③光學系統(tǒng);④信號檢測、存貯、顯示、分析系統(tǒng);⑤細胞分選系統(tǒng)。流式細胞儀的結(jié)構(gòu)見圖1-2-4。圖1-2-4流式細胞儀的光路結(jié)構(gòu)圖(一)流動室與液流驅(qū)動系...[繼續(xù)閱讀]

    (一)熒光測量靈敏度靈敏度的高低是衡量儀器檢測微弱熒光信號的重要指標,一般以能檢測到單個微球上最少標有FITC或PE熒光分子數(shù)目來表示,一般現(xiàn)在的FCM均可達到600個熒光分子。(二)儀器的分辨率分辨率是衡量儀器測量精度的指標...[繼續(xù)閱讀]

    眾所周知,流式細胞儀是通過內(nèi)置的激光器發(fā)射的激光激發(fā)熒光染料,通過熒光將488nm或其他波長的光轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪徊ㄩL的光;并通過光電倍增管將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?并由計算機統(tǒng)計處理變?yōu)榭勺x數(shù)據(jù)。在流式細胞儀上常用的熒光素有...[繼續(xù)閱讀]

    FCM對單細胞快速進行各種參數(shù)分析必須以單細胞為基礎(chǔ),根據(jù)各種組織成分的特點可選擇不同的分散細胞方法,以期達到單細胞產(chǎn)額高、損傷少的目的。盡管標本制備已形成了標準化的程序,但實際操作中總會出現(xiàn)這樣或那樣的問題。...[繼續(xù)閱讀]

    正常組織、瘤組織和淋巴結(jié)等活檢組織以及內(nèi)鏡(胃鏡、食管鏡等)取材標本,由于材料較少,制備起來比較麻煩。但其制備方法與實體組織基本相似;(1)取材后立即放入盛少許PBS液的青霉素小瓶中;(2)另取一只小燒杯,杯口用300目尼龍網(wǎng)蓋...[繼續(xù)閱讀]

    石蠟包埋組織單細胞分散方法的建立,擴大了流式細胞術(shù)的應(yīng)用范圍。對大量臨床隨訪資料通過病理包埋組織的流式細胞術(shù)分析,可以重新得到深入研究和利用?，F(xiàn)將常用的制備石蠟包埋組織單細胞方法介紹如下。(一)實驗方法(1)把石...[繼續(xù)閱讀]

    血液是天然的單個細胞分散的細胞懸液,血細胞在生理狀態(tài)下呈分散的游離狀態(tài)。它是流式細胞分析的理想樣品。血液中的主要細胞成分為白細胞、紅細胞和血小板;而其中白細胞主要成分又分為淋巴細胞、單核細胞和粒細胞。但在血...[繼續(xù)閱讀]

    (一)制備方法(1)無菌抽取骨髓液0.5ml;(2)將骨髓標本滴入含1000U/ml肝素抗凝劑的1mlPBS液中;(3)再加入PBS液稀釋至10ml;(4)用吸管吸取5ml稀釋骨髓液徐徐加入盛有4ml的人類淋巴細胞分離液液面之上;(5)在以上條件下,骨髓有核細胞分層在PBS-人類...[繼續(xù)閱讀]

    (一)培養(yǎng)細胞的特征一般細胞培養(yǎng)分為懸浮培養(yǎng)和貼壁培養(yǎng),由于細胞的增殖有可能形成大小不等的細胞團塊或連接成片。如果兩個或多個細胞粘連在一塊或細胞碎片過多都將影響FCM結(jié)果,進而導(dǎo)致實驗失敗。所以,制備合格的培養(yǎng)細胞...[繼續(xù)閱讀]