體外定點(diǎn)突變體或CRISPR/Cas9介導(dǎo)的敲入突變體快速篩選方法的建立

摘要： 目的 探討建立一種體外定點(diǎn)突變體或CRISPR/cas9介導(dǎo)的敲入突變體的快速篩選方法，以提高突變體篩選效率，降低實(shí)驗(yàn)成本。方法 針對構(gòu)建的體外定點(diǎn)突變體或CRISPR/Cas9介導(dǎo)的敲入突變體，采用3′端第1、2和3個(gè)核苷酸分別與突變序列相匹配的篩選引物進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR),通過瓊脂糖凝膠電泳檢測是否有特異性擴(kuò)增條帶。結(jié)果 利用特異性突變篩選引物進(jìn)行PCR在正確的突變...