靶向小鼠CREPT基因CRISPR/Cas9敲除質(zhì)粒的構(gòu)建
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)
頁(yè)數(shù): 4 2023-02-28
摘要: 目的 利用規(guī)律間隔成簇短回文重復(fù)序列/相關(guān)蛋白9(CRISPR/Cas9)系統(tǒng)構(gòu)建靶向小鼠CREPT基因的敲除質(zhì)粒。方法 根據(jù)CRISPR/Cas9靶點(diǎn)設(shè)計(jì)原則靶向小鼠CREPT基因的sgRNAs,與體外轉(zhuǎn)錄載體pUC57-sgRNA連接,構(gòu)建CREPT基因敲除質(zhì)粒;體外切割實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證設(shè)計(jì)的sgRNAs是否具有活性。結(jié)果 設(shè)計(jì)了3條sgRNAs并分別準(zhǔn)確插入pUC57-sgRNA...