利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)建立長鏈非編碼RNA SNHG1基因敲除細(xì)胞系并研究其功能

摘要： 目的 利用CRISPR/Cas9介導(dǎo)的同源定向修復(fù)機(jī)制構(gòu)建長鏈非編碼RNA(lncRNA）核仁小分子RNA宿主基因1(SNHG1）穩(wěn)定敲除的A549細(xì)胞系，并進(jìn)行功能研究。方法 設(shè)計(jì)靶向SNHG1基因的小向?qū)NA(sgRNA），將其克隆到LentiCRISPR v2質(zhì)粒中，構(gòu)建Cas9‐sgSNHG1質(zhì)粒。以A549細(xì)胞基因組DNA為模板，PCR擴(kuò)增5′同源臂（5′Arm）和...