CRISPR/Cas9介導(dǎo)下UPS系統(tǒng)-E3泛素連接酶ITCH基因敲除細(xì)胞株的初步構(gòu)建
神經(jīng)藥理學(xué)報(bào)
頁數(shù): 6 2023-02-26
摘要: 目的:構(gòu)建CRISPR/Cas9介導(dǎo)下泛素-蛋白酶體系統(tǒng)(ubiquitin proteasome system,UPS)-E3泛素連接酶(atrophin 1interacting protein 4,ITCH)基因敲除細(xì)胞株。方法:在人ITCH基因的PAS結(jié)構(gòu)域內(nèi)設(shè)計(jì)3個(gè)sgRNA,構(gòu)建3個(gè)分別同時(shí)表達(dá)ITCH-sgRNA、Cas9和eGFP的三合一質(zhì)粒。經(jīng)測(cè)序序列正確的重...