利用CRISPR/Cas9技術(shù)構(gòu)建豬的LDLR基因敲除細(xì)胞

摘要： 利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)構(gòu)建豬的低密度脂蛋白受體基因LDLR敲除細(xì)胞：根據(jù)NCBI數(shù)據(jù)庫豬LDLR基因(Gene ID為396801)序列設(shè)計sg RNA靶位點，構(gòu)建敲除打靶載體，通過電轉(zhuǎn)染豬胎兒成纖維細(xì)胞，經(jīng)G418篩選獲得細(xì)胞克隆，進行PCR擴增和T載體克隆測序，經(jīng)序列比對計算基因敲除效率。結(jié)果表明，依照CRISPR/Cas9系統(tǒng)GN20GG法則，在LDLR基因第一外...