基于CRISPR/Cas9系統(tǒng)構(gòu)建青鳉突變體
水產(chǎn)學(xué)報(bào)
頁數(shù): 11 2022-01-17
摘要: 青鳉是研究基因功能、器官發(fā)生和發(fā)育機(jī)制的模式生物之一,基因編輯技術(shù)已在青鳉中得到廣泛應(yīng)用,但利用CRISPR/Cas9技術(shù)構(gòu)建青鳉突變體的詳細(xì)過程還未見報(bào)道。為了完整詳細(xì)地闡明青鳉突變體的構(gòu)建過程,實(shí)驗(yàn)以青鳉Olpax6.1基因的敲除為例,首先利用ChopChop網(wǎng)站設(shè)計(jì)獲得Olpax6.1基因gRNA的靶點(diǎn);其次通過PCR擴(kuò)增和質(zhì)粒酶切分別獲得gRNA和Cas9 mRNA體外...