黑斑側(cè)褶蛙腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的原代培養(yǎng)及鑒定

摘要： 為了建立蛙腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)方法，實(shí)驗(yàn)以黑斑側(cè)褶蛙腦組織為實(shí)驗(yàn)材料，在無(wú)菌條件下分離出大腦灰質(zhì)，利用0.1%Ⅱ型膠原酶和膠原酶-分散酶進(jìn)行消化，經(jīng)過(guò)Percoll密度梯度離心后，將獲取的腦微血管段接種于鼠尾膠包被的培養(yǎng)瓶中，于28°C、5%CO₂條件下原代培養(yǎng)蛙腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞，并通過(guò)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察和Ⅷ因子相關(guān)抗原免疫熒光對(duì)細(xì)胞進(jìn)行鑒定，最后用四唑藍(lán)比色法(MTT)測(cè)定...