脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)是由許多脫氧核苷酸以3,5-磷酸二酯鍵連接成線性多聚核苷酸的生物大分子化合物,分子質(zhì)量至少在幾千道爾頓。DNA是生命的最基本物質(zhì)之一,廣泛存在于所有動植物細胞、微生物體內(nèi)。DNA分子的功能是...[繼續(xù)閱讀]

    2.1.2.1STR遺傳標記序列1981年,Miesfeld等在人δ和β珠蛋白基因之間發(fā)現(xiàn)一類[TG]n組成的雙核苷酸重復序列。1989年,Litt和Weber等在研究心肌肌動蛋白基因時,也發(fā)現(xiàn)[CA]n二堿基為核心序列的串聯(lián)重復。同年,Edwards等應(yīng)用測序方法分析“自毀容...[繼續(xù)閱讀]

    STR自動分型技術(shù)廣泛應(yīng)用于法醫(yī)DNA實驗室,具有自動化程度高、快速、靈敏、準確、穩(wěn)定、重復性好等特點。聯(lián)合采用多重復合擴增反應(yīng)、毛細管電泳和熒光檢測,可以得到十幾個到幾十個STR基因座的分型信息。STR自動分型技術(shù)的核心...[繼續(xù)閱讀]

    2.2.1.1DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)1957年,ArthurKornberg等從大腸桿菌中分離出了一種以DNA為模板催化單核苷酸聚合的酶,稱之為Kornberg酶。它是由單一多肽組成的球蛋白,相對分子量為103kD。Kornberg酶后被證實為DNA聚合酶Ⅰ。DNA聚合酶Ⅰ可被枯草桿菌蛋...[繼續(xù)閱讀]

    隨著PCR技術(shù)的發(fā)展,先后出現(xiàn)了一些問題,如非特異性擴增產(chǎn)物的出現(xiàn),引物二聚體的形成,甚至凝膠電泳上無擴增帶。這些問題的產(chǎn)生限制了PCR技術(shù)的應(yīng)用。熱啟動PCR技術(shù)的問世解決了這些問題,使PCR技術(shù)更加完美。2.2.2.1熱啟動PCR的產(chǎn)...[繼續(xù)閱讀]

    2.2.3.1所需化學試劑及配制熱啟動耐高溫DNA聚合酶制備時所需的化學試劑及其配制方法如表2-2。表2-2熱啟動耐高溫DNA聚合酶制備所需化學試劑及配制方法續(xù)表2-22.2.3.2耐高溫TaqDNA聚合酶的制備1.酶蛋白表達(1)取出菌種,將少許的冰凍菌種...[繼續(xù)閱讀]

    2.3.1.1有機熒光染料概述近年來,隨著有機合成技術(shù)的不斷進步,有機熒光染料也迎來了發(fā)展的黃金時代,多種多樣的有機熒光染料從實驗室走向工業(yè)和民用的多個領(lǐng)域,發(fā)揮著越來越重要的作用,如電致發(fā)光顯示屏、化學發(fā)光和電化學發(fā)...[繼續(xù)閱讀]

    2.3.2.1熒光共振能量轉(zhuǎn)移機理熒光共振能量轉(zhuǎn)移(Frsterresonanceenergytransfer,FRET)是指當其中一個熒光基團(能量供體)處于激發(fā)狀態(tài)時,會將其能量轉(zhuǎn)移給相鄰的分子(能量受體),從而引起能量受體的激發(fā),實現(xiàn)能量由供體向鄰近的受體轉(zhuǎn)移的...[繼續(xù)閱讀]

    法醫(yī)DNA熒光檢測試劑盒,由于其對多重PCR擴增靈敏性、均一性、保真性的嚴苛要求,引物的熒光標記以及規(guī)?；呒兌鹊臒晒鈽擞浺锏姆蛛x成為制約該試劑盒高質(zhì)量、規(guī)?；a(chǎn)的最重要的因素之一。由于全自動DNA合成儀的廣泛推廣...[繼續(xù)閱讀]

    2.4.1.1基因座選擇和排布從法醫(yī)學個體識別和親緣鑒定的實用性考慮,選擇STR基因座的基本條件包括兩方面的要求,即多態(tài)性程度和擴增的穩(wěn)定性。理想的基因座應(yīng)具備以下幾個條件:a.等位基因長度在500bp以下。b.重復單位為三核苷酸以...[繼續(xù)閱讀]