空白對(duì)照即不進(jìn)行標(biāo)記的細(xì)胞(圖2-4)。設(shè)置空白對(duì)照的目的是確定待測(cè)標(biāo)本的基礎(chǔ)熒光閾值或檢測(cè)染色標(biāo)記是否有效。因?yàn)槟承┘?xì)胞會(huì)被激發(fā)產(chǎn)生自發(fā)熒光,影響結(jié)果判斷。圖2-4空白對(duì)照示意圖...[繼續(xù)閱讀]

    在前面流式細(xì)胞分析技術(shù)的基本原理內(nèi)容中,已經(jīng)介紹流式補(bǔ)償調(diào)節(jié)的原理和基本方法。這里提出補(bǔ)償對(duì)照的概念。所謂補(bǔ)償對(duì)照是指將用于多色流式分析的各種熒光抗體分別與細(xì)胞樣本反應(yīng),逐個(gè)進(jìn)行單色標(biāo)記,以測(cè)定熒光信號(hào)的重...[繼續(xù)閱讀]

    流式技術(shù)的發(fā)展促進(jìn)了越來(lái)越多的熒光染料的研發(fā)。傳統(tǒng)的熒光染料如FITC、PE、APC、PerCP等在流式細(xì)胞術(shù)中應(yīng)用很廣。近年來(lái),隨著多色流式細(xì)胞分析技術(shù)特別是六色以上分析的發(fā)展,一些新型的熒光染料也逐漸得到應(yīng)用。激發(fā)波長(zhǎng)為...[繼續(xù)閱讀]

    熒光抗體主要指各種熒光染料標(biāo)記的單克隆抗體。流式細(xì)胞技術(shù)的發(fā)展與熒光抗體技術(shù)的發(fā)展密不可分。既有用同一熒光染料標(biāo)記針對(duì)不同簇分化抗原(CD)的單克隆抗體,也有用不同熒光素標(biāo)記的針對(duì)同一CD分子的單克隆抗體,這為多色...[繼續(xù)閱讀]

    (一)盡量使用直接標(biāo)記抗體直接標(biāo)記抗體是指熒光素標(biāo)記的單克隆或多克隆抗體,一步染色,操作方便,影響因素少,結(jié)果準(zhǔn)確。(二)根據(jù)待測(cè)抗原表達(dá)量選擇熒光染料標(biāo)記抗體細(xì)胞表面和內(nèi)部的各種抗原表達(dá)量并不相同。熒光染料之間的...[繼續(xù)閱讀]

    按照抗原抗體反應(yīng)的基本特點(diǎn),抗體與抗原的比例合適才能達(dá)到最佳的反應(yīng)效果。在應(yīng)用一種新的抗體進(jìn)行細(xì)胞染色時(shí),需要根據(jù)信噪比來(lái)決定抗體最合適的工作濃度。首先將細(xì)胞的濃度固定(一般1×106/管),依據(jù)抗體使用說(shuō)明書建議的...[繼續(xù)閱讀]

    [1]王建中.臨床流式細(xì)胞術(shù)[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,2005.[2]努納茲.流式細(xì)胞術(shù)原理與科研應(yīng)用簡(jiǎn)明手冊(cè)[M].劉秉慈,許增祿,譯.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005.[3]梁智輝,朱惠芬,陳九武.流式細(xì)胞術(shù)基本原理與實(shí)用技術(shù)[M].武漢:華中科技大學(xué)...[繼續(xù)閱讀]

    FACSCalibur的開(kāi)機(jī)較簡(jiǎn)單,做好一些裝備的準(zhǔn)備工作、預(yù)熱5min后,就可以進(jìn)行檢測(cè)了。(一)開(kāi)機(jī)前準(zhǔn)備1.裝鞘液打開(kāi)鞘液筒抽屜,關(guān)閉鞘液筒壓力閥,去除鞘液筒壓力。斷開(kāi)鞘液筒管路連接(白色為液路,藍(lán)色為氣路)和液面檢測(cè)器連接。移去鞘...[繼續(xù)閱讀]

    FACSComp是BD公司自動(dòng)設(shè)置儀器的應(yīng)用軟件,它不僅可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)微球(CaliBRITEbeads)來(lái)監(jiān)測(cè)儀器的工作狀態(tài),還可以為人類外周血淋巴細(xì)胞免疫分群的應(yīng)用提供常規(guī)的、自動(dòng)化的儀器設(shè)置。流式細(xì)胞儀包含了一些靈敏的光電元件,為了保證實(shí)驗(yàn)...[繼續(xù)閱讀]

    CellQuest軟件是從流式細(xì)胞儀上進(jìn)行數(shù)據(jù)獲取和分析的通用軟件?？赏ㄟ^(guò)CellQuest軟件對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)整和設(shè)定,同時(shí)進(jìn)行細(xì)胞的檢測(cè)。并且CellQuest軟件也是流式細(xì)胞儀數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)內(nèi)的必要軟件。因此,熟練掌握CellQuest軟件的各項(xiàng)功能非常...[繼續(xù)閱讀]