流式細胞儀(flowcytometer,FCM)是在光電子技術(shù)、激光技術(shù)、熒光化學(xué)、單克隆抗體技術(shù)及計算機技術(shù)等交叉融合的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種先進的生物醫(yī)學(xué)儀器設(shè)備。流式細胞術(shù)(flowcytometry,FCM)就是利用流式細胞儀對細胞進行快速、多參數(shù)...[繼續(xù)閱讀]

    待測標本的細胞懸液,在流式細胞儀精細的液流和壓力控制下,受到鞘液的包裹和約束,細胞排成單列由流動池噴嘴高速噴出,形成細胞液柱。當細胞液柱通過流式細胞儀檢測區(qū),細胞液柱中的細胞在入射的激光束照射下產(chǎn)生前向散射(f...[繼續(xù)閱讀]

    (一)前向散射(FSC)樣本流中的細胞在激光束的照射下會產(chǎn)生散射光,正對著激光方向的散射光信號在前向小角度進行檢測,稱為前向散射(圖1-1)。它的值反映細胞體積的大小。(二)側(cè)向散射(SSC)90°方向的光電倍增管接收到的散射光稱為側(cè)...[繼續(xù)閱讀]

    熒光信號是指熒光素分子受到激發(fā)后發(fā)出的熒光。在流式細胞分析中,經(jīng)過熒光抗體標記的細胞通過激光照射檢測區(qū)時,在激光照射下,熒光染料吸收能量發(fā)生能量躍遷,也就是熒光染料中的原子核周圍電子從基礎(chǔ)態(tài)軌道躍遷到激發(fā)態(tài)軌...[繼續(xù)閱讀]

    流式通道包括散射光通道和熒光通道。散射光通道包括前向散射光通道和側(cè)向散射光通道。熒光通道是指檢測熒光信號的通道。前向散射光通道和側(cè)向射光通道是分別接收前向散射(FSC)光和側(cè)向散射(SSC)光的通道,可以分別簡稱為FS...[繼續(xù)閱讀]

    流式細胞術(shù)中使用圖形化的方式對數(shù)據(jù)進行顯示和分析,其中承載大量細胞參數(shù)的圖形稱為流式圖(圖1-4)。其中單參數(shù)分析的圖形表達方式為直方圖;對兩個以上參數(shù)進行分析的圖形表達方式可以是散點圖、二維等高線圖與二維密度圖...[繼續(xù)閱讀]

    流式細胞分析中的熒光染色常需要兩種或兩種以上標記不同熒光素的單克隆抗體或不同染料的熒光素進行多色分析。兩種或兩種以上熒光素受激發(fā)后發(fā)出不同波長的熒光,理論上可以通過分光鏡和濾光片等方式將不同波長的熒光之間...[繼續(xù)閱讀]

    流式細胞分析的對象主要是細胞和微球。但是實際上流式細胞分析的標本中可能或多或少含有細胞碎片或其他顆粒性物質(zhì),它們也會被流式細胞儀檢測到,從而影響目標細胞或微球的分析結(jié)果。流式細胞術(shù)可以通過設(shè)定閾值的方法將細...[繼續(xù)閱讀]

    每一個流式通道都有自己特定的光電倍增管,而每一個光電倍增管的電壓都是分別調(diào)控的,因此流式細胞分析需要用到多少檢測通道,就需要相應(yīng)設(shè)定多少個光電倍增管的電壓。如FITC、PE兩種熒光抗體標記細胞的流式分析中需要預(yù)先分...[繼續(xù)閱讀]

    前面已經(jīng)介紹光譜重疊與熒光補償?shù)母拍睢９庾V重疊會導(dǎo)致不同熒光通道之間的信號干擾,流式細胞術(shù)通過調(diào)節(jié)各個熒光通道之間的補償將干擾信號減去,保證流式分析結(jié)果的正確。調(diào)節(jié)補償是流式細胞分析的一項基本要求。不同的流...[繼續(xù)閱讀]