層析是用于蛋白質(zhì)分離純化的重要技術(shù)手段。它是基于固定相(層析介質(zhì))對(duì)流動(dòng)相(蛋白質(zhì)溶液)中各組分阻滯能力大小不同而實(shí)現(xiàn)對(duì)各組分的分離。按照蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)不同而實(shí)現(xiàn)分離的層析包括:(1) 根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷不同而分...[繼續(xù)閱讀]

    為了研究某一特定蛋白的功能,或是利用該特定蛋白研究其他基因的功能,需要將該蛋白在體外表達(dá)出來。將該蛋白的編碼DNA 序列擴(kuò)增出來,然后應(yīng)用酶學(xué)的辦法將該目的片段和表達(dá)載體DNA 片段連接,組裝成一個(gè)新的DNA 分子,再用適當(dāng)?shù)?..[繼續(xù)閱讀]

    蛋白質(zhì)的定性分析是指確定樣本中是否有蛋白質(zhì)存在,以及存在的是何種蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)定量分析是確定樣本中總蛋白含量或某一單一蛋白含量。蛋白質(zhì)是由許多氨基酸通過肽鍵連接構(gòu)成的生物大分子,氨基酸、肽鍵、蛋白質(zhì)的組成特...[繼續(xù)閱讀]

    蛋白質(zhì)相互作用及通過相互作用而形成的蛋白質(zhì)復(fù)合物是細(xì)胞行使各種基本功能的主要承擔(dān)者,幾乎所有重要的生命活動(dòng),包括DNA 復(fù)制與轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)合成與分泌、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和代謝等都離不開蛋白之間的相互作用。常用的蛋白質(zhì)相互...[繼續(xù)閱讀]

    激光掃描共聚焦顯微鏡(confocal laser scanning microscopy ,CLSM)是20世紀(jì)80年代中期在顯微分光光度計(jì)和流式細(xì)胞儀的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種以光學(xué)為基礎(chǔ),融機(jī)械、電子、計(jì)算機(jī)為一體的高精度現(xiàn)代化新型顯微測(cè)試儀器,它脫離了傳統(tǒng)光學(xué)顯...[繼續(xù)閱讀]

    基因是遺傳信息的載體,而生命活動(dòng)、表觀形狀的體現(xiàn)等是由基因的編碼產(chǎn)物——蛋白質(zhì)所執(zhí)行。越來越多的證據(jù)表明,基因表達(dá)和蛋白質(zhì)豐度及蛋白質(zhì)功能之間的相關(guān)性不完全一致,為了在一個(gè)樣本中平行檢測(cè)多種蛋白表達(dá)及功能信...[繼續(xù)閱讀]

    DNA 重組質(zhì)粒是分子克隆的一類,而分子克隆和聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction ,PCR)是兩種廣泛用于復(fù)制特定DNA 序列的方法。DNA 重組系在體外將外源目的基因插入載體DNA ,載體一般來源于質(zhì)?；虿《?重組形成一個(gè)具有自我復(fù)制能力...[繼續(xù)閱讀]

    基因轉(zhuǎn)錄是指以DNA 的一條鏈為模板,按照堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則,在RNA 聚合酶復(fù)合物的作用下合成RNA 的過程,是基因表達(dá)過程中的重要環(huán)節(jié)(彩圖4-2-1) ?；虻霓D(zhuǎn)錄水平受到機(jī)體精細(xì)的調(diào)控,過程復(fù)雜,涉及多個(gè)生物學(xué)過程。機(jī)體重要生物...[繼續(xù)閱讀]

    人類基因組計(jì)劃的完成和人類單倍型計(jì)劃的實(shí)施,使得人類基因組中以單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism ,SNP)為主的多種分子遺傳標(biāo)記不斷地被發(fā)現(xiàn)報(bào)道。隨著分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)檢測(cè)技術(shù)日新月異的發(fā)展,近年來的研究發(fā)...[繼續(xù)閱讀]

    RNA 干擾(RNA interfering ,RNAi)是指由與靶基因序列同源的雙鏈RNA (doublestranded RNA ,dsRNA)引發(fā)的廣泛存在于生物體內(nèi)的序列特異性基因轉(zhuǎn)錄后的沉默過程。其通過細(xì)胞中的核糖核酸酶Ⅲ 家族成員之一的dsRNA 特異性核酸酶Dicer 將dsRNA 裂解成由...[繼續(xù)閱讀]